瓊脂糖凝膠電泳（Agarose Gel Electrophoresis）

支持介質(zhì)：瓊脂糖（從海藻中提取的多糖，加熱溶解后冷卻形成多孔凝膠）。

核心特點(diǎn)：孔徑較大（50-200nm）、操作簡單、分辨率適中、成本低。

適用對象：大分子物質(zhì)，如核酸（DNA/RNA）（常用 1%-2% 瓊脂糖凝膠分離 100bp-50kb 的 DNA 片段）、大型蛋白質(zhì)復(fù)合物。

典型應(yīng)用：

DNA 片段分離（如 PCR 產(chǎn)物鑒定、酶切片段分析）；

核酸純化（切膠回收目標(biāo) DNA 片段）；

瓊脂糖凝膠電泳結(jié)合 EB（溴化乙錠，已逐步被更的 SYBR Green 替代）染色，可直觀觀察核酸條帶。

前處理（關(guān)鍵：保證工件表面潔凈，決定涂層附著力）

脫脂：用堿性脫脂劑（如氫氧化鈉、表面活性劑）去除工件表面的油污、灰塵（可采用噴淋或浸泡，溫度 50-60℃，時(shí)間 5-10 分鐘）。

酸洗 / 除銹：針對鋼鐵工件，用鹽酸、硫酸溶液去除表面氧化皮和銹蝕（時(shí)間 3-8 分鐘，需加緩蝕劑防止過腐蝕）。

磷化：工件浸入磷化液（如鋅系、錳系），表面形成一層致密的磷酸鹽薄膜（厚度 1-5μm），增強(qiáng)涂層與金屬的附著力，提升耐腐蝕性（溫度 30-40℃，時(shí)間 5-10 分鐘）。

水洗：用去離子水多次清洗工件表面殘留的化學(xué)藥劑，避免污染后續(xù)電泳槽液（通常需 3-4 道水洗，后一道為純水洗，電導(dǎo)率＜10μS/cm）。

烘干：在 80-120℃烘箱中烘干工件表面水分（時(shí)間 15-30 分鐘），避免電泳時(shí)出現(xiàn)氣泡或涂層不均。

水洗 1（脫脂后）

目的：沖洗工件表面殘留的脫脂劑，避免帶入后續(xù)酸洗 / 磷化槽。

工藝：常溫水洗，時(shí)間 1-2 分鐘，可采用噴淋方式提率。

控制：水洗后工件表面 pH 值應(yīng)接近中性（6-8）。

磷化處理

目的：在工件表面形成一層均勻致密的磷酸鹽結(jié)晶膜（厚度 1-5μm），增強(qiáng)電泳涂層的附著力和耐腐蝕性。

工藝：浸入磷化液（常用鋅系、錳系），溫度 30-45℃，時(shí)間 5-10 分鐘（噴淋磷化效率更高）。

關(guān)鍵：磷化膜應(yīng)呈灰色或淺灰色，結(jié)晶均勻，無露底、發(fā)花現(xiàn)象（通過檢測膜重：2-5g/m2）。