典型操作流程（以 SDS-PAGE 為例）

凝膠制備：根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)分子量配置凝膠（小分子用高濃度膠，如 15%；大分子用低濃度膠，如 8%），分為 “分離膠”（下層，起分離作用）和 “濃縮膠”（上層，使樣品濃縮成窄帶，提高分辨率）。

樣品處理：蛋白質(zhì)樣品與 SDS 上樣緩沖液（含 SDS、還原劑 β- 巰基乙醇、溴酚藍(lán)指示劑）混合，95℃加熱 5-10 分鐘，使蛋白質(zhì)變性并結(jié)合 SDS。

上樣與電泳：將處理好的樣品加入凝膠加樣孔，同時(shí)加入 “蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)品”（Marker），接通電源（濃縮膠用低電壓，分離膠用高電壓），溴酚藍(lán)指示劑遷移至凝膠底部時(shí)停止電泳。

檢測(cè)與分析：

染色：常用考馬斯亮藍(lán)染色（簡(jiǎn)單快速，檢測(cè)限～0.1μg）或銀染（靈敏度高，檢測(cè)限～1ng）；

成像與分析：通過(guò)凝膠成像儀拍攝條帶，結(jié)合 Marker 判斷目標(biāo)蛋白質(zhì)的分子量，通過(guò)條帶亮度半定量分析蛋白質(zhì)含量。

電泳加工的核心原理

電泳涂裝基于 “電泳、電沉積、電滲、電解” 四大電化學(xué)過(guò)程，具體流程如下：

電泳：將工件（作為陰極或陽(yáng)極）與對(duì)應(yīng)的電極板放入含有帶電涂料顆粒（如陽(yáng)離子樹(shù)脂、顏料）的電泳槽中，通直流電后，涂料顆粒因電荷作用向工件表面定向移動(dòng)。

電沉積：涂料顆粒到達(dá)工件表面后，因電場(chǎng)作用發(fā)生電化學(xué)反應(yīng)（如中和、交聯(lián)），逐漸沉積形成不溶于水的薄膜。

電滲：沉積過(guò)程中，涂層內(nèi)部的水分在電場(chǎng)作用下向槽液中遷移，使涂層逐漸致密、干燥。

電解：水在電極表面發(fā)生電解反應(yīng)（陰極產(chǎn)氫氣、陽(yáng)極產(chǎn)氧氣），此過(guò)程需通過(guò)工藝控制避免氣泡影響涂層質(zhì)量。

前處理（關(guān)鍵：保證工件表面潔凈，決定涂層附著力）

脫脂：用堿性脫脂劑（如氫氧化鈉、表面活性劑）去除工件表面的油污、灰塵（可采用噴淋或浸泡，溫度 50-60℃，時(shí)間 5-10 分鐘）。

酸洗 / 除銹：針對(duì)鋼鐵工件，用鹽酸、硫酸溶液去除表面氧化皮和銹蝕（時(shí)間 3-8 分鐘，需加緩蝕劑防止過(guò)腐蝕）。

磷化：工件浸入磷化液（如鋅系、錳系），表面形成一層致密的磷酸鹽薄膜（厚度 1-5μm），增強(qiáng)涂層與金屬的附著力，提升耐腐蝕性（溫度 30-40℃，時(shí)間 5-10 分鐘）。

水洗：用去離子水多次清洗工件表面殘留的化學(xué)藥劑，避免污染后續(xù)電泳槽液（通常需 3-4 道水洗，后一道為純水洗，電導(dǎo)率＜10μS/cm）。

烘干：在 80-120℃烘箱中烘干工件表面水分（時(shí)間 15-30 分鐘），避免電泳時(shí)出現(xiàn)氣泡或涂層不均。

水洗 1（脫脂后）

目的：沖洗工件表面殘留的脫脂劑，避免帶入后續(xù)酸洗 / 磷化槽。

工藝：常溫水洗，時(shí)間 1-2 分鐘，可采用噴淋方式提率。

控制：水洗后工件表面 pH 值應(yīng)接近中性（6-8）。