聚丙烯酰胺凝膠電泳（Polyacrylamide Gel Electrophoresis, PAGE）

支持介質(zhì)：丙烯酰胺（Acr）與交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺（Bis）聚合形成的凝膠，孔徑可通過(guò)調(diào)整 Acr/Bis 比例控制（5%-20% 凝膠對(duì)應(yīng)不同孔徑）。

核心特點(diǎn)：孔徑?。?-10nm）、分辨率（可區(qū)分分子量相差 1kDa 的蛋白質(zhì)）、重復(fù)性好。

適用對(duì)象：小分子物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、小分子 DNA（＜1kb）、RNA。

關(guān)鍵分支：

SDS-PAGE（十二烷基硫酸鈉 - PAGE）：常用的蛋白質(zhì)分析技術(shù)。SDS 是陰離子去污劑，可使蛋白質(zhì)變性并結(jié)合等量 SDS（每克蛋白質(zhì)結(jié)合 1.4g SDS），消除蛋白質(zhì)自身電荷差異，僅通過(guò)分子大小實(shí)現(xiàn)分離，可用于蛋白質(zhì)分子量測(cè)定、純度鑒定。

Native-PAGE（非變性 PAGE）：不添加 SDS 和還原劑，蛋白質(zhì)保持天然構(gòu)象和電荷，分離依賴(lài) “電荷 + 大小 + 形狀”，可用于分析蛋白質(zhì)活性、復(fù)合物組成。

電泳涂裝（核心：控制電場(chǎng)與槽液參數(shù)）

工件掛裝：將烘干后的工件固定在掛具上，確保與電極接觸良好（掛具需定期清理，避免涂層堆積影響導(dǎo)電性）。

電泳槽浸涂：將工件放入電泳槽中，控制關(guān)鍵參數(shù)：

電壓：陰極電泳通常 60-300V，陽(yáng)極電泳 20-80V（電壓越高，涂層沉積越快，但過(guò)高易產(chǎn)生針孔）；

溫度：槽液溫度 20-30℃（溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致涂料變質(zhì)，過(guò)低則沉積效率下降）；

時(shí)間：1-5 分鐘（根據(jù)涂層厚度需求調(diào)整，通常干膜厚度 20-50μm）；

槽液 pH 值：陰極電泳 pH 6.0-7.5，陽(yáng)極電泳 pH 8.0-9.5（需定期監(jiān)測(cè)并調(diào)整，避免影響涂料穩(wěn)定性）。

超濾水洗：工件從電泳槽取出后，用 “超濾水”（通過(guò)超濾膜過(guò)濾的槽液）清洗表面殘留的未沉積涂料，回收涂料并減少?gòu)U水排放（環(huán)保關(guān)鍵步驟）。

水洗 1（脫脂后）

目的：沖洗工件表面殘留的脫脂劑，避免帶入后續(xù)酸洗 / 磷化槽。

工藝：常溫水洗，時(shí)間 1-2 分鐘，可采用噴淋方式提率。

控制：水洗后工件表面 pH 值應(yīng)接近中性（6-8）。

后處理階段（固化：形成終涂層性能）

通過(guò)高溫固化使?jié)衲そ宦?lián)成致密的干膜，賦予涂層硬度、耐腐蝕性等關(guān)鍵性能。

瀝干

操作：將工件懸掛瀝干表面水分，避免烘干時(shí)水分聚集導(dǎo)致涂層流掛。

烘干固化

核心：通過(guò)高溫使涂料中的樹(shù)脂、交聯(lián)劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，形成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。

關(guān)鍵參數(shù)：

溫度：陰極電泳 160-180℃，陽(yáng)極電泳 140-160℃（需根據(jù)涂料類(lèi)型調(diào)整，誤差 ±5℃）；

時(shí)間：20-40 分鐘（從工件達(dá)到設(shè)定溫度開(kāi)始計(jì)時(shí)，確保完全固化）。

注意：升溫速率需控制（通常 5-10℃/min），避免涂層因急劇升溫產(chǎn)生氣泡。

冷卻

操作：工件從烘箱取出后自然冷卻至室溫（或強(qiáng)制風(fēng)冷），避免高溫下接觸灰塵。

檢驗(yàn)與修整

檢測(cè)項(xiàng)目：

外觀：無(wú)針孔、流掛、色差、縮孔等缺陷；

性能：膜厚（20-50μm，用膜厚儀測(cè)量）、附著力（劃格法測(cè)試，需達(dá) 0 級(jí)或 1 級(jí)）、耐腐蝕性（鹽霧測(cè)試、耐沖擊性）；

修整：輕微缺陷（如小顆粒）可打磨后補(bǔ)涂，嚴(yán)重缺陷需退膜返工。